本发明属于分子生物学领域,公开了一种沉默非编码癌基因H19RNA表达的单链反义RNA及其效果检测方法。所述单链反义RNA是以H19RNA的第五外显子的部分序列作为靶位点,设计并合成的23nt,27nt,31nt,35nt,39nt单链反义RNA,其5’和3’均为羟基,不带有其它化学修饰。采用脂质体介导法转染人宫颈癌Hela细胞和人前列腺癌PC3细胞,sasRNA能够持久、高效、特异地抑制H19RNA的表达。流式细胞检测sasRNA介导的H19RNA表达水平的下调导致细胞周期阻滞于G2/M期。本发明的单链反义RNA效果明显,检测方法操作简便,成本低廉,具有广阔的应用前景。
本发明公开了一种检测铅离子的方法,该方法将序列表中序列1、2分别用缓冲溶液稀释后,混合杂交后形成核酸酶溶液,序列1和序列2的摩尔比为1:1~3:1;将预处理后的待测样品加入到核酸酶溶液中,静置使核酸酶与铅离子完全反应,之后加入序列3,序列3与2摩尔比1:1~3:1;再静置,然后再加入氯化血晶素,得到A溶液;B溶液是含有鲁米诺,双氧水和对碘苯酚的缓冲水溶液;再将A溶液和B溶液按照体积比为1:2~2:1的比例缓慢混合,混合反应的同时检测混合溶液的化学发光强度;根据混合溶液的化学发光强度得到待测样品的铅离子浓度。本发明用于检测铅离子含量,具有灵敏度高,选择性好,且具有很好的重复性,操作简单易行,可直接应用于环境中铅离子的检测。
本发明公开了一种用于快速检测磺胺嘧啶残留的免疫胶体金试纸条及其制备方法,属于兽药残留的免疫化学速测技术领域。本发明的试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬,其特征在于,在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫;所述的结合垫上包被有所述的抗磺胺嘧啶单克隆抗体-胶体金标记物,该单克隆抗体由杂交瘤细胞系BDRXN(保藏号为CCTCC-C200522)所分泌得到的。所述的硝酸纤维素膜上分别包被有磺胺嘧啶-载体蛋白偶联物构成的检测线和兔抗鼠IgG构成的质控线。本发明的试纸条有灵敏度高、特异性强、操作简便、检测快速、准确等显著优点。
本发明涉及一种转铁蛋白受体含量检测试剂盒,所述检测试剂盒由试剂Ⅰ和试剂Ⅱ组成,所述试剂Ⅰ的组分包括:缓冲剂、防腐剂、螯合剂、表面活性剂和水;所述试剂Ⅱ的组分包括:包被抗转铁蛋白受体抗体的胶乳微球颗粒、缓冲剂、防腐剂、助悬剂和水;所述包被抗转铁蛋白受体抗体的胶乳颗粒的粒径为120~200nm。还涉及转铁蛋白受体含量检测试剂盒的制备方法,其中包被抗转铁蛋白受体抗体的胶乳微球颗粒采用化学交联法制备;本发明通过选择合适粒径的氨基基团胶乳微球颗粒及使用化学交联法制备胶乳微球颗粒,使制备的转铁蛋白受体检测试剂盒提高了灵敏度和稳定性、延长了货架期和开瓶稳定期。
本发明公开了一种制备Α-雄烷醇的方法,该方法包括:将块菌属菌株进行液体发酵,得到含有Α-雄烷醇的发酵液或菌丝体。本发明还公开了一种检测上述发酵液或菌丝体中Α-雄烷醇含量的方法。本发明利用块菌液体发酵生产Α-雄烷醇,与化学合成相比,具有成本低、周期短、操作简单、质量可控、可以有效防止化学残留等优点。
本发明公开了一种基于双扩增技术联合检测甲、乙型流感病毒的试剂盒及其应用。将采集的样本经细胞裂解液裂解后释放病原体核酸,经过逆转录和转录过程,实现病原体核酸片段的扩增。扩增后的RNA产物加入到包被有包被探针的微孔中,同时加入特异探针及放大探针,其中包被探针可与特异探针CES的一端结合固定扩增产物RNA;特异探针LES的一端结合到RNA产物上,另一端与放大探针结合,实现信号放大。标记有多生物素的放大探针随后与链霉亲和素‑HRP酶联物结合,最后加入HRP酶化学发光底物,在化学发光仪上进行检测。本发明无需RNA提取,在检测中不易污染,灵敏度高、特异性强,可广泛用于甲、乙型流感病毒核酸检测。
本发明公开了基于紫外红外SF6分解气体检测方法的背景气体修正方法,具体包括以下步骤:S1、气体采样:将载气通过热导检测器的参考臂后与SF6放电分解气体混合,形成测试气体;S2、扫描识别:利用可溯源设备对SF6分解气体的典型样本的成分进行扫描,获取SF6的分解气体的成分、浓度数据,并进行记录;使用蚁群算法筛选所有的全光谱数据,获得有效光谱数据,本发明涉及SF6分解气体检测技术领域。该基于紫外红外SF6分解气体检测方法的背景气体修正方法,可解决之前的电化学测量方法的测不准(干扰、漂移)、电化学传感通过在器频繁更换等问题;也能对实验室色谱测量提供补充,测量快捷(即时出结果)、无耗材(色谱柱等)。
本发明提供一种ELISA试剂盒及其制备方法和检测方法。该ELISA试剂盒以点击化学进行信号放大,是铜催化的叠氮炔烃环加成反应(CuAAC),通过合成炔烃化链霉亲和素或叠氮化链霉亲和素作为检测生物素的探针,再加入点击化学反应底物叠氮化生物素或炔烃化生物素,增加检测抗体上生物素的数量,然后再和链霉亲和素标记的HRP结合,从而起到放大信号的效果,有效地提高了检测人IL‑6的实际样本的灵敏度。
本发明公开了一种钯纳米颗粒离散薄膜检测氢气的方法,包括如下步骤:首先准备六氟乙酰丙酮钯(Ⅱ)、福尔马林、石英玻璃基底、高纯氮和碳支持膜;在真空环境下将六氟乙酰丙酮钯(Ⅱ)作为前驱体通入反应室,六氟乙酰丙酮钯(Ⅱ)作为前驱体与石英玻璃基底表面发生化学吸附和化学反应;福尔马林作为前驱体与已经结合在基底的六氟乙酰丙酮钯(Ⅱ)前驱体发生化学反应。本发明能有效提高传感薄膜对氢气的响应速率,并且能够有效避免纯钯在高浓度氢气中引起的相变现象,保证检测的准确性,解决了现有光纤氢气传感器中的钯钇合金薄膜容易被空气中氧气毒化,导致薄膜起泡开裂等引起零点漂移,影响了氢气检测准确性的问题。
本发明公开了一种液体中组分的检测方法,在待测液体中加入聚集诱导发光化合物以及纳米通道膜,使得所述聚集诱导发光化合物与待测组分在纳米通道内充分聚合,通过所述纳米通道膜的电化学信号和/或荧光信号的变化,获得待测组分的浓度;其中,所述纳米通道膜具有能跟所述聚集诱导发光化合物或所述待测组分结合的表面基团,所述聚集诱导发光化合物具有至少两个探针基团,所述探针基团用于与待测组分的目标基团或电子空轨道结合。通过本发明,使用聚集诱导发光化合物作为纳米通道膜的检测探针,不仅克服了现有技术中待测组分必须与DNA配对还能放大电化学信号的技术缺陷,还将荧光信号的变化引入纳米通道膜检测技术,使得检测更为准确。
本发明提供了一种痕量内毒素的快速检测方法,可直接灵敏高通量地检测多种样品中痕量内毒素,并提供相应的试剂盒,该试剂盒人工抗体的96孔酶标板、内毒素标准品溶液、兔抗内毒素多克隆抗体(一抗)、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体(二抗)和化学发光试剂组成。该方法将集特异性样品预处理和ELISA检测于一体,人工抗体耐高温、酸碱和有机溶剂,可高效特异性分离和富集样品中的痕量内毒素,ELISA则可特异快速地检测所富集的内毒素,结合高灵敏度的化学发光法,有效提高ELISA检测内毒素的灵敏度、准确性和稳定性,从而能灵敏、快速、高通量地检测各种样品中痕量内毒素。
本发明肺炎支原体和肺炎衣原体核酸联合检测试剂盒及其应用。将采集的样本经细胞裂解液裂解后释放病原体核酸,经过逆转录和转录过程,实现病原体核酸片段的扩增。扩增后的RNA产物加入到包被有包被探针的微孔中,同时加入特异探针及放大探针,其中包被探针可与特异探针CES的一端结合固定扩增产物RNA;特异探针LES的一端结合到RNA产物上,另一端与放大探针结合,实现信号放大。标记有多生物素的放大探针随后与链霉亲和素‑HRP酶联物结合,最后加入HRP酶化学发光底物,在化学发光仪上进行检测。本发明无需RNA提取,在检测中不易污染,灵敏度高、特异性强,可广泛用于肺炎支原体和肺炎衣原体核酸联合检测核酸检测。
本发明公开了一种检测手足口病病原体核酸的试剂盒及其应用。将采集的样本经细胞裂解液裂解后释放病原体核酸,经过逆转录和转录过程,实现病原体核酸片段的扩增。扩增后的RNA产物加入到包被有包被探针的微孔中,同时加入特异探针及放大探针,其中包被探针可与特异探针CES的一端结合固定扩增产物RNA;特异探针LES的一端结合到RNA产物上,另一端与放大探针结合,实现信号放大。标记有多生物素的放大探针随后与链霉亲和素‑HRP酶联物结合,最后加入HRP酶化学发光底物,在化学发光仪上进行检测。本发明无需RNA提取,在检测中不易污染,灵敏度高、特异性强,可广泛用于手足口病病原体核酸检测。
本发明公开了一种快速检测细菌的聚烯烃纳米纤维膜传感器及其制备方法。本发明采用聚烯烃共聚物为基体材料,经表面化学改性、生物活性分子的固相合成工艺,制备出化学改性的聚烯烃纳米纤维膜的生物传感器。采用本发明制备出来的纳米纤维膜生物传感器,在性能方面克服了传统检测细菌存在的细菌培养,数菌落等耗时耗力和准确性差的缺点,利用三磷酸腺苷、荧光素酶、荧光素之间发光原理,快速检测细菌释放出来的ATP,实现了对生物有害物质快速响应的纳米纤维膜传感器。并且由于采用了固相合成,使生物活性酶很好的固定在纳米纤维膜表面,可以起到反复循环地检测细菌。可以广泛地应用在生物技术、医疗卫生、食品药品检测、水处理等领域。
本发明公开了一种基于深度强化神经网络的内河船舶干舷检测方法,将激光雷达与联动云台设立在内河岸边的高杆上,云台带动激光雷达调整检测高度和朝向角,对船舶的一侧进行扫描,获取不同检测参数下的船舶轮廓图像,利用强化学习神经网络作为强化学习值函数的逼近器,将船舶轮廓信息输入强化学习神经网络,从而确定当前激光雷达与联动云台做出何种动作来正确识别当前船舶干舷。本发明基于卷积神经网络对图像的识别能力,结合强化学习算法共同构建了深度强化神经网络,克服了深度学习网络在船舶超载识别领域现有的技术不足,提升了激光雷达对船舶干舷信息的检测能力,从而为内河船舶吃水情况的自动判别提供了技术支持。
一种检测蛋白质的羰基含量的试剂盒。它以2,4-二硝基苯肼比色法为原理,制备出一种可简便、灵敏的检测各种组织器官、血清、培养细胞和细胞器等的蛋白质羰基含量的试剂盒。该试剂盒是一套由7瓶试剂共同配套使用的蛋白质羰基检测试剂盒,7瓶试剂中都为液体;每个试剂瓶中装有固定浓度和固定体积的试剂;试剂瓶1放入装有冰袋9的泡沫盒8中,其余试剂一同放入一个由硬纸塑料材料制成的长方形盒子10中。其使用不需要昂贵的设备,样品处理简单,可广泛应用于各种疾病如衰老、动脉硬化症、糖尿病和帕金森氏综合症、风湿性关节炎等疾病的早期辅助诊断,抗氧化保健食品、抗氧化药物和化妆品等的评价,还可以用于评价由于一些环境有害因子如辐射、化学毒物等对机体造成的氧化损伤。
一种纳米微球放大技术压电DNA生物传感器检测超痕量DNA的方法,在石英晶片上镀一薄层金膜或银膜,然后让石英晶振选择性的吸附DNA,通过DNA分子杂交,结合成双链DNA,将标记有能与双链DNA选择性作用药物或生物试剂的纳米微球,对靶向双链DNA分子形成进行确证和作质量放大,检测超痕量的目标DNA。本发明通过标记了能与双链DNA选择性作用药物的纳米微球,对靶向双链DNA分子形成进行确证和作质量放大,检测超痕量的目标DNA。与常规的压电DNA生物传感器相比,可使最低检测限改善2~5个数量级,因而不仅可检测超痕量的目标DNA,且选择性强、灵敏度高。
本发明公开了一种脂联素含量检测试剂盒及其制备方法。本发明试剂盒由彼此独立的试剂Ⅰ和试剂Ⅱ组成;其中,试剂Ⅰ的组分包括:生物缓冲剂、表面活性剂、促凝剂、防腐剂、保护剂、螯合剂和水;试剂Ⅱ的组分包括:包被脂联素抗体的胶乳颗粒、生物缓冲剂、螯合剂、表面活性剂、防腐剂、助悬剂、封闭剂、稳定剂、保护剂和水。本发明检测试剂盒的包被脂联素抗体的胶乳颗粒粒径为80-200nm,在此粒径范围内,检测的灵敏度及线性范围要明显优于其它粒径的胶乳颗粒。本发明采用化学交联法制备致敏胶乳颗粒,脂联素抗体与胶乳颗粒结合紧密,不易从胶乳颗粒上脱落,提高了抗体结合的稳定性,最终有效提高了试剂盒的稳定性。
本发明公开了一种原位加载条件下金属微区氢渗透定量检测装置,包括微区氢渗透检测单元、可电化学充氢或模拟各种腐蚀环境的氢渗透发生单元、气氛和pH值可调的溶液缓冲罐和可升降载物台,所述微区氢渗透检测单元包括可移动支撑架和毛细管微电解池,片状拉伸试样氢检测部位与毛细管微电解池相连,对应的氢渗入部位与氢渗透发生单元相连,所述氢渗透发生单元包括与溶液缓冲罐连接的充氢槽,所述充氢槽上设有辅助电极,所述溶液缓冲罐放置在可升降载物台上,腐蚀介质存放于溶液缓冲罐中。本发明与现有技术相比优点在于:实现在原位加载过程中,对局部特定面积可控微区进行电化学充氢或模拟各种气氛、pH可调腐蚀环境条件下多次充氢和放氢的定量检测。
本发明属于生物化工领域,具体涉及一种检测酪氨酸酶的化合物FL‑O‑T的制备方法和应用。所述化合物FL‑O‑T结构通式如下:其中R1、R2、R3为氢、烷基或其他常见取代基。化合物FL‑O‑T可作为检测酪氨酸酶的荧光探针,该化合物FL‑O‑T通过荧光素类衍生物与间羟基苄溴经亲核取代反应合成。本发明所述化合物FL‑O‑T是通过荧光素类衍生物FT‑OH与间羟基苄溴经亲核取代反应合成得到。目标化合物具有高度化学选择性,能够在体外和体内跟踪检测酪氨酸酶,并成功实现监测癌细胞和斑马鱼中酪氨酸酶的活性。
本发明公开了一种基于高光谱成像技术的冷鲜肉品质无损检测方法,首先采集并制备大量的冷鲜肉样本,采用高光谱成像系统采集各个冷鲜肉样本的高光谱数据;然后,根据国标要求采用物理化学方法测得各个冷鲜肉样本被测品质指标的物理化学参照值;最后结合机器学习和化学计量学等数据处理方法采用得到的冷鲜肉高光谱数据和物理化学参照值数据建立冷鲜肉被测品质指标的高光谱预测模型。采用本发明方法检测牛肉TVB‑N含量时,用MCS法剔除冷鲜牛肉异常样本后,采用CG算法划分冷鲜牛肉样本集,采用CARS算法优选冷鲜牛肉TVB‑N含量特征波段建立PLSR模型,模型达到很好的预测性能。
本发明涉及一种用于检测小鼠组织内Bt杀虫蛋白的免疫磁小体及其制备方法。免疫磁小体由抗Bt杀虫蛋白多克隆抗体包被,颗粒大小50nm;制备方法是通过超声破碎和磁性吸附,获得趋磁细菌的纯化磁小体,将佐剂溶合Bt杀虫蛋白后免疫小鼠,经分离纯化得到鼠抗Bt杀虫蛋白多克隆抗体,将抗体通过羧基-氨基化学偶联法偶联磁小体,得到检测小鼠组织内Bt杀虫蛋白的免疫磁小体。用本发明的免疫磁小体,经化学发光EIA检测,发光单位为83kcounts/μg磁小体;发光强度和Bt蛋白浓度相关性表明,随着蛋白浓度的不断增加,发光强度不断下降,范围在1-103ng/ml,最小检测浓度1ng/ml;用于实际检测小鼠组织内Bt杀虫蛋白含量灵敏度较高,结果稳定性强且操作简单,显示了良好的应用前景。
本发明属于兽药残留的免疫化学速测技术领域。 公开了一种用于快速检测磺胺类药物残留的胶体金试纸条,该 试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背 衬构成。PVC背衬一端依次粘附样品垫、结合垫,中间粘附硝 酸纤维素膜,另一端粘附吸水垫,其特征在于结合垫上包被了 抗磺胺类药物特异性单克隆抗体-胶体金标记物;硝酸纤维素 膜上包被了N-磺胺-4-氨基苯甲酸-载体蛋白偶联物作为 检测线,包被了兔抗鼠IgG作为质控线。本发明还公开一种能 够分泌专门识别磺胺类药物单克隆抗体的杂交瘤细胞BDRXN -2的制备,该杂交瘤细胞保藏在CCTCC,其保藏号为CCTCC -C200629。本发明的检测磺胺类药物的试纸条具有灵敏度高, 特异性强,操作简便,检测快速、准确和检测费用低廉等显著 优点。
本发明公开了一种LIBS与NIRS光谱同步采集的土壤养分快速检测系统及方法,属于光学与土壤养分检测领域,本发明所设计的检测系统通过合理布局,能够保证LIBS采集装置和NIRS采集装置同步采集,并且采集的光谱数据来自同一样品,从而有效减小样品时空变化对其检测精度的影响。本发明所设计的检测方法通过拟合不同基体化学物质的含量与各养分特征谱线强度之间的线性关系,结合建立预测各基体化学物质的含量的NIRS预测模型,对LIBS检测得到的相应养分特征谱线强度进行校正,有效消除基体效应对光谱检测的干扰,实现土壤养分的高精度稳定检测。
本发明公开了一种基于金表面修饰葫芦[7]脲检测生物活性物质的方法,利用金表面修饰葫芦[7]脲,结合电流‑电压检测手段或电化学阻抗谱测试手段,根据引入生物活性物质后产生的电化学阻抗或跨膜电流的变化信息,实现对生物活性物质的测定。本发明利用金表面修饰葫芦[7]脲构建电化学传感器,采用电化学方法利用主客作用来实现对待测生物活性物质的识别;所得传感器性质稳定、重复性好,灵敏度高、选择性好,适合推广应用。
本发明提供了一种乳腺癌检测试剂盒,该试剂盒包括有鼠抗人SPA-1单克隆抗体。本发明揭示乳腺癌患者乳腺组织癌细胞中特异性高表达SPA-1蛋白分子,并且其表达程度与乳腺癌细胞的转移能力密切相关,在级别不同的乳腺癌组织中表达也有明显差异,且SPA-1在正常组织、癌旁组织、癌组织表达有明显的组织特异性,进一步在细胞系水平上的研究表明SPA-1可以促进乳腺癌细胞的转移能力。本发明以SPA-1作为乳腺癌及其癌细胞转移检测的生物标记,提供包括鼠抗人SPA-1单克隆抗体的试剂盒,利用免疫组织化学方法检测乳腺癌患者肿瘤组织SPA-1表达水平。
本发明公开一种纳米钯/碳纳米管‑MXene复合材料及其在硝基芳烃类爆炸物检测中的应用,Ti3C2Tx MXene表面负载有钯纳米粒子,通过钯纳米粒子在MXene表面催化生长碳纳米管,碳纳米管直径范围为20‑40 nm,制备步骤:提供一种Ti3C2Tx MXene纳米片;将MXene纳米片静置在含钯前驱体溶液中,并在得到的Pd NPs/MXene复合材料上CVD,MXene纳米片层数少层,其在硝基芳烃类爆炸物检测中的应用,步骤如下:梯度配置硝基类爆炸物的比对标准溶液;将涂覆有纳米钯/碳纳米管‑MXene的玻碳电极插入所配置的标准溶液中富集;以铂丝作为对电极,以Ag/AgCl电极作为参比电极、以涂覆有纳米钯/碳纳米管‑MXene的玻碳电极作为工作电极,得到待测硝基类爆炸物的检测线及线性范围,检测方法为循环伏安法和线性扫描伏安法电化学法。
本发明涉及一种检测样品中痕量乙酰甲胺磷的方法,并提供了试剂盒。利用多巴胺氧化聚合法,在载体材料上合成可特异性结合乙酰甲胺磷的人工抗体(分子印迹聚合物,MIP),用MIP特异性分离富集不同样品中的痕量乙酰甲胺磷后,利用酶抑制-化学发光法测定所富集的乙酰甲胺磷含量。MIP对温度、有机溶剂耐受性高,可直接特异性分离富集不同样品中的痕量乙酰甲胺磷,去除其他有机磷农药、叶绿素等多种干扰物的影响。通过将MIP特异性样品预处理与酶抑制法有机结合,MIP-酶抑制法不仅可利用酶抑制法特异性快速检测某种农药,还可提高检测灵敏度和特异性,可直接、快速、灵敏、高通量地检测环境和食品中的痕量靶农药。
本发明公开了一种SF6降解后气液相产物的检测方法,所述方法包括:采用电化学方法对SF6气体进行降解,获得气相产物和液相产物;所述降解中,通过电位滴定装置观察氧化还原电位的变化从而判断是否到达反应终点;若判断到达反应终点,则采用便携式气体氟气体检测仪对所述气相产物进行检测,通过颜色变化判断所述气相产物的组分;采用氟离子电极传感器对所述液相产物进行含氟离子检测,通过观察最佳的电位响应特性来测定出氟离子含量及变化;通过19F NMR核磁共振装置检测所述液相产物的含氟化合物的量,从而计算SF6在电化学电池中的总消耗。该方法可有效地实现SF6电化学降解后气液相产物的检测。
本发明公开了一种道路填料表面能参数的检测方法,选取已知表面能参数的四种化学试剂;采用蒸汽吸附法测试得到填料对其中一种化学试剂(甲苯)蒸汽的吸附等温线,通过Gibbs方程求解得到该试剂对填料的扩散压力;通过四种试剂的毛细上升法测试得到的m2~t关系直线,结合甲苯的扩散压力通过Washburn公式计算得到填料的真实毛细管有效半径,通过Washburn公式计算得到其他三种试剂对填料的扩散压力,结合三种试剂的已知表面能参数,通过Good?van?Oss?Chaudhury(GvOC)联立方程组求解得到填料的表面能。本发明针对填料样品选取的测试方法更为合理,试验测试结果更为客观准确,试验精度较现有试验方法得到显著提高。
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