本发明属于生物技术领域,具体为来源于深海细菌E4A9T的蛋白酯酶E8及其表达纯化、晶体结构和应用。所述酯酶E8有241个氨基酸,分子量为26.28kDa;在表达菌株中高度可溶性表达, 可获得高表达量和高酶活的酯酶E8;底物为对硝基苯酚丁酸酯(C4)时催化活性最高,酯酶E8在有机溶剂中仍保持较高活性。酯酶E8的晶体结构分辨率达到1.5Å,该结构由6个β折叠和15个α螺旋组成,其中,第77位丝氨酸,第101位天冬氨酸与第222位组氨酸所构成的催化三连体组成酶学活性中心。该酯酶酶学活性高,成本低廉,可用于食品加工及食品风味改良、油脂水解、皮革绢纺原料脱脂、废水处理、洗涤工业等领域,E8的三维结构可在工业酶制剂中底物改造及提高酶活方面具有广泛的应用前景。
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