权利要求
1.用于磷酸化肽的富集材料制备方法,其特征在于:包括以下步骤: 步骤一、模板分子选择:首先采用分子对接、计算机模拟的方法,针对待富集的特异性磷酸化多肽,考虑模板化合物对pH值、温度的稳定性,印迹聚合物形成时间和空间立体结构等因素的影响,虚拟合成磷酸化肽富集分子印迹材料,以此选出最佳的模板化合物; 步骤二、富集磷酸化肽的分子印迹纳米颗粒制备:以步骤一中选择出的最佳模板化合物,以甲基丙烯酸为功能单体,在氮气保护下混合改性硅胶纳米颗粒,应用分子印记技术结合微波辅助合成方法,制备磷酸化肽的分子印迹纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的用于磷酸化肽的富集材料制备方法,其特征在于:步骤二中所述应用分子印记技术结合微波辅助合成方法,制备磷酸化肽的富集材料,具体方法包括: (1)将模板化合物和功能单体甲基丙烯酸分散在乙腈溶液中充分混合、静置;在该混合溶液中加入交联剂,充分摇匀,模板化合物与交联剂的摩尔比为1:32~1:12,持续静置6~10小时,制得预聚合溶液; (2)在氮气保护下,将改性硅胶纳米颗粒与预聚合溶液,搅拌混合,再加入引发剂,混合均匀后,微波辅助聚合反应;反应结束后,停止加热,产物冷却至室温、离心分离;产物用甲醇-酸水混合液反复超声清洗,直至液相色谱检测不到模板化合物;然后将其至于在35~55℃下真空干燥,制得特异性磷酸化肽的分子印迹纳米颗粒。 3.根据权利要求2所述的用于磷酸化肽的富集材料制备方法,其特征在于:所述改性硅胶纳米颗粒的制备方法包括: 将SiO 2颗粒与硅胶改性剂混合,氮气保护下充分搅拌,使之均匀分散于甲苯中,并去除溶液中的氧气,混合物于70℃±10℃条件下持续充氮回流反应过夜,待反应完成后,离心分离,产物用乙醇和去离子水顺序洗涤,真空或冷冻干燥,得到改性硅胶纳米颗粒;其中SiO 2颗粒与硅胶改性剂的质量比为1:6~1:24。 4.根据权利要求2所述的用于磷酸化肽的富集材料制备方法,其特征在于:所述改性硅胶纳米颗粒的制备方法包括: A、将FeCl 3~6H 20和FeCl 2·4H 2O混合溶液,加入氨水调节溶液pH值至11.5~12.5,在氮气保护下搅拌,微波辅助合成得到Fe 3O 4
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