本发明属于基因工程领域,涉及一种新型嗜盐古菌胞外蛋白酶的制备方法及其应用;步骤为:首先基于嗜盐古菌DYF 46的基因组获得编码基因hly;通过分子克隆技术将hly连接到载体上构建重组质粒;将重组质粒转化原核生物宿主,得到转化后的重组宿主细胞在含有卡那霉素的LB液体培养基中培养,经培养、诱导表达后低温离心收集菌体,于细胞裂解液中进行重悬,经超声破碎、离心收集上清液,用于重组蛋白纯化;采用镍亲和层析纯化蛋白结合柱上复性方法获得成熟酶,经凝胶过滤层析纯化后获得高纯度Hly。本发明得到的Hly具有优良的酶学特性,可应用于洗涤剂、废水处理、制药和环境修复等复杂、含盐的降解蛋白质的生产加工过程中。
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