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脱氧胆酸(DC)酶联免疫吸附测定试剂盒

脱氧胆酸(DC)酶联免疫吸附测定试剂盒

942
规格/型号：暂无
品牌：暂无
应用领域：废水处理设备
产地：其他 - 其他
厂家/供应商：上海科翰盛生物科技有限公司
咨询电话:：18616221933（请说明信息源自“中冶有色技术网”）
更新时间：2024-03-06
级别：待认证

脱氧胆酸(DC)酶联免疫吸附测定试剂盒说明介绍

保存条件： 2-8℃冷藏 数量： 666 保质期： 6 适应物种： 多物种 用途范围： 科研实验 产地： 上海 品牌： 科翰盛 规格： 48T 96T 样本： 血清,血浆,尿液,组织等 检测方法： 酶联免疫 应用： 科研 货号： KHSJ18154



检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 （ELISA） 。往预先包被植物果糖脱氧胆酸（DC）酶联免疫吸附测定试剂盒抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脱氧胆酸（DC）酶联免疫吸附测定试剂盒 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度 （OD值） ,计算样品活性。

样品收集、处理及保存方法

1.样本不能含叠氮钠 （NaN3） ,因为叠氮钠 （NaN3） 是辣根化物酶 （HRP） 的剂。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。

3.植物萃取液或其它相关样本:请1000 xg离心20分钟,取上清即可检测。

4. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存

于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1. 酶标仪 （450nm）

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在 2-8℃ ,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的 浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封 （低温干燥） 保存。

3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12 孔×8 条

12 孔×4 条

无

标准品

0.3mL*6 管

0.3mL*6 管

无

样本稀释液

6mL

3mL

无

检测抗体-HRP

10mL

5mL

无

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物 A

6mL

3mL

无

底物 B

6mL

3mL

无

终止液

6mL

3mL

无

封板膜

2张

2 张

无

说明书

1份

1份

无

自封袋

1个

1个

无

注:标准品（S0-S5） 浓度依次为:0,20,40,80,160,320 U/mL

试剂的准备

20缓冲液加 19 份的蒸馏水。

洗板方法

1. min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5 次。

2.自动洗板机:每孔注入洗液 350 μL,浸泡 1min,洗板 5 次。

1. 从室温平衡 20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50 μL;

3. 样本孔先加待测样本 10 μL,再加 40 μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶 （HRP） 标记的检测抗体 100 μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次 （也可用洗板机洗板） 。

6.每孔加入底物 A、B 各 50 μL,37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入终止液 50 μL,15min内,在 450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

试剂盒性能

1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R值,大于等于

0.9900。

2.灵敏度:检测浓度小于 0.1 U/mL。

3. 特:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。

5. 贮藏:2-8℃ ,避光防潮保存。

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