本发明公开了一种新型的低起始量DNA甲基化建库方法。本发明提供了一种制备甲基化测序文库的方法,依次包括如下步骤:(1)取基因组DNA,进行氧化脱氨处理;(2)进行全基因组扩增;(3)构建测序文库。步骤(1)中,采用酶化学法进行所述氧化脱氨处理,采用采用双加氧酶(TET2)进行氧化处理,采用胞嘧啶脱氨酶(APOBEC)进行脱氨处理。全基因组扩增的目的为将ng级别的DNA转换为μg级别的DNA。本发明提供的方法具有如下有益效果:可以做到极低起始量的基因组DNA甲基化处理,起始量可低至单细胞级别;操作步骤简单;对DNA的损伤最小;改善了现有微量甲基化建库的GC碱基分布不均衡,覆盖度低,duplication rate高等现象。
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