本发明公开了一种核苷四磷酸的合成方法。所述方法包括以下步骤:将核苷与环状磷酸化试剂发生选择性磷酸化反应,再经氧化、水解开环,即得所述核苷四磷酸。所述环状磷酸化试剂的结构如式I所示:
式I。本方法将核苷在该高选择性磷酸化试剂作用下,选择性地生成5'‑核苷四磷酸,在此过程中并不需要将3'‑OH(以及2'‑OH)保护起来,即能有效抑制3'(以及2'‑)四磷酸的生成。本发明合成的核苷四磷酸在DNA测序、标记、延伸等生物学领域具有广泛用途,目前其销售价格昂贵,合成方法复杂,反应选择性差;而本发明提供的合成方法选择性好,容易分离纯化,且所需实验条件简单,合成过程均为常规化学反应,可用于大规模推广使用。
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