本发明提供一种基于α螺旋把手提高蛋白核酸生物耦合效率的方法;首先设计携带非天然氨基酸的把手H‑tag,其次构建含有H‑tag和待测蛋白的融合重组表达质粒,再次表达纯化在H‑tag中含有非天然氨基酸的融合重组蛋白,最后对融合蛋白H‑tag中非天然氨基酸和核酸底物上的耦合基团进行高效点击化学连接。本方法使用α螺旋把手为非天然氨基酸提供可控的蛋白表面反应条件,避免待测蛋白表面复杂的结构、电荷和极性纳米环境,从而实现对蛋白与核酸进行高效点击化学连接等目标。
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