本发明涉及一种利用枯草芽孢杆菌表达天蚕素AD的方法及其制备方法。以枯草芽孢杆菌WB800N为宿主菌株,大肠‑枯草穿梭载体为表达载体,设计合成融合蛋白编码基因(SPSacB)SUMO‑CAD,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,成功构建重组表达载体pGJ148‑(PSacB)SUMO‑CAD。应用化学转化方式转入宿主菌感受态细胞中,利用麦芽糖诱导发酵,实现外源蛋白成功表达,通过NI‑NTA柱和蛋白质纯化分析仪纯化后获得了纯度较高的融合蛋白,利用SUMO酶切后获得重组抗菌肽,之后对发酵条件进行优化。本发明成本低,利于分离纯化。
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