本发明涉及生物化学和检验与检测领域,具体涉及黄色荧光蛋白标记的Annexin A5及其制备方法和在制备凋亡检测试剂中的应用。本发明以pET28a‑Annexin A5‑EGFP‑his重组质粒为模板,构建了重组质粒pET28a‑Annexin A5‑Citrine‑his、pET28a‑Annexin A5‑Venus‑his、pET28a‑Annexin A5‑Ypet‑his。大量表达Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白,通过Ni柱亲和层析纯化获得了这三种蛋白,纯度约为90%。流式细胞仪检测结果显示:Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白均可以识别和标记凋亡细胞,它们与凋亡细胞的亲和力分别是3113nmol/L,444.3nmol/L和391.6nmol/L。以上结果显示Annexin A5‑Citrine、Annexin A5‑Venus和Annexin A5‑Ypet融合蛋白均可以用于凋亡细胞的识别和标记。
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“用于凋亡细胞识别和标记的融合蛋白及其制备方法和应用” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
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