本发明公开了一种用表皮干细胞构建的人工角 膜上皮植片的制备及用于移植修复因角膜缘干细胞缺损而失 明的眼表的用途。表皮干细胞构建的人工角膜上皮植片,无菌 采取成人颈部或关中奶山羊耳缘皮肤,用组块培养法和克隆筛 选法分离纯化表皮干细胞,用无血清培养基进行扩增,并对所 获干细胞进行CK19、P63、 integrin-β1等表皮干细胞的标 志蛋白免疫组织化学检测;再将纯化的表皮干细胞接种在去上 皮细胞的人类羊膜支架上,无血清培养基培养,培养21天后, 表皮干细胞在羊膜上分化形成复层,成为表皮干细胞羊膜植 片;经透射电镜观察,表皮干细胞分为5-6层细胞;具有正 常角膜上皮相似结构。以羊为实验动物模型进行自体或同种异 体表皮干细胞羊膜植片移植均取得良好效果。
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