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恶性疟原虫HRPII蛋白单克隆抗体的制备方法

752   编辑：管理员   来源：中冶有色技术网  
2023-03-19 07:36:06
本发明涉及一种恶性疟原虫HRPII蛋白单克隆抗体的制备方法,以恶性疟原虫HRPII蛋白为靶抗原,分析选择A、B两个优势抗原表位;分别将A、B两个优势抗原表位重复后通过连续四个甘氨酸连接,形成重组蛋白C;采用大肠杆菌最嗜密码子,将重组蛋白C氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列;化学合成上一步骤得到的核苷酸序列,并在其上下游分别添加酶切位点BamHI和EcoRI;将上一步合成得到的核苷酸片段插入表达载体PET-28a(+),构建重组蛋白C表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白C;超声破菌并低温离心后,取溶液上清通过镍琼脂糖亲和层析柱,洗脱得到纯化重组蛋白C;重组蛋白C多次免疫Balb/c小鼠后,取其脾脏细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,多轮筛选得到6株杂交瘤细胞株;纯化单抗并分别标记辣根过氧化物酶(HRP),ELISA正交实验配定最佳单抗配对组合。
声明：
“恶性疟原虫HRPII蛋白单克隆抗体的制备方法” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系该技术所有人。
我是此专利(论文)的发明人(作者)
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标签：
化学分析
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