一种高效表达与制备外分泌型人源AFP的方法,该方法主要包括如下三个方面的内容:(1)利用基因合成技术合成AFP的DNA序列,再采用基因克隆和分子生物学方法构建酵母重组表达质粒PpICZ?α?A-AFP,并进行质粒抽提;(2)使用毕赤酵母表达系统体外诱导表达分泌型AFP重组蛋白,并通过优化表达时间、诱导剂添加量等条件得出最佳诱导条件;(3)优化硫酸铵分级沉淀,从发酵液上清中分离纯化得到分泌到胞外的AFP重组蛋白,在55%硫酸铵浓度下目的蛋白AFP几乎全部析出,且纯度高达98.844%;本发明将纯化得到的分泌重组蛋白AFP用临床检测
电化学发光法检测其生物活性,其值达3500ng/mL。
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