本发明公开了一种根癌农杆菌介导沟叶结缕草的遗传转化方法,包括菌液浓度、侵染时间、共培养时间、抗生素浓度、炼苗移栽和转基因植株的PCR检测等步骤。内容如下:最佳遗传转化体系为菌液OD
600值为0.4,侵染30 min,共培养3 d后进行选择培养。特美汀在选择培养阶段最适抑菌浓度为250 mg/L,潮霉素愈伤组织筛选的最适选择压为40 mg/L,生根筛选的最适浓度为15 mg/L。通过GUS活性的组织化学分析和PCR鉴定,显示目的基因已成功转入沟叶结缕草基因组中。上述研究将为沟叶结缕草基因功能研究和分子育种提供重要技术支撑。该方法优点在于:获得了一种稳定、高效的沟叶结缕草遗传转化体系,为其遗传改良提供便利,同时为其功能基因的验证打下关键的前期基础。
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