本发明公开一种应用于蛋白质组样品制备的迷你蛋白反应器及其应用,涉及分析化学领域。该迷你蛋白反应器主要由固定化金属螯合层析IMAC磁珠和C18beads组成。预计将从不到10μL血清作为样本进行蛋白质组概况分析,并可能用于转化研究。此方法采用串联柱分离技术实现了蛋白质组学中复杂的样品制备步骤,包括磷酸化蛋白质预浓缩,还原,烷基化和消化,以及脱盐和分馏。本发明的方法易于使用、耗时短(<2小时),高通量,灵敏度高(可检测>100个磷酸化蛋白质)、重复性良好(R>0.99);是一种无论从数量还是从种类上,挖掘到最多蛋白质组数据的有效方法,推测其可应用于非标记定量磷酸化蛋白质组学的技术转化研究。
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