本发明公开了一种以葡萄糖氧化酶功能化的金纳米粒子为探针的电致化学发光生物传感器构建方法及其在蛋白质激酶活性检测和抑制剂筛选中的应用,属于电致化学发光领域。将生物素标记的DNA和GOx共轭修饰到AuNPs表面制备多功能纳米探针GOx/AuNPs/DNA;在蛋白质激酶A和三磷酸腺苷的作用下,修饰于电极表面的多肽发生磷酸化,通过抗原-抗体的特异性识别作用,将生物素标记的抗磷酸化丝氨酸抗体结合到多肽的磷酸化位点上;再利用亲和素对生物素反应的介导作用,将GOx/AuNPs/DNA捕获到电极表面。蛋白质激酶A的浓度越大,多肽修饰电极表面产生的磷酸化位点越多,组装于传感界面的GOx就越多,GOx催化葡萄糖产生的H2O2越多,鲁米诺的发光越强,实现了对蛋白质激酶A的高灵敏检测。
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“多功能纳米探针GOx/Au NPs/DNA的制备方法及其激酶检测应用” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
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