本发明公开了一种温度可控的基于切刻内切酶Nt.BstNBI和碱性磷酸酶的信号放大的
电化学p53基因传感器的制备方法,包括金盘热电极、与目标p53序列互补的两端分别标记了生物素和巯基的捕获探针、标记了链霉亲和素的碱性磷酸酶和切刻内切酶Nt.BstNBI。当有p53存在时,与捕获探针杂交,之后诱导Nt.BstNBI进行切割,释放出目标物p53进行下一次杂交酶切循环,并通过对电极施加电流改变酶切温度以提高酶的活性,使酶切过程更快更彻底;酶切前后对电极进行检测时通过改变电极温度使ALP催化活性提高,放大酶切前后的峰电流差值,氧化峰电流的减小值与目标p53的浓度呈线性关系,实现对p53基因的高灵敏检测。
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