本发明是通过应用现代分子生物学技术从结核 分枝杆菌基因组文库中克隆了rmlB基因,其编码dTDP-D- 葡萄糖-4,6-脱氢酶(RmlB),并在大肠杆菌中表达了结核分 枝杆菌的RmlB酶蛋白(rmlB是结核杆菌的生长相关基因,其 基因所表达的蛋白酶是结核杆菌细胞壁形成过程中必须的),菌 株经过超声破碎细胞,离心,取上清液,利用pET表达载体上的组氨酸标记,采用组氨酸-Ni+亲和层析技术纯化得到RmlB酶蛋白,并建立了RmlB酶蛋白的活性测定方法。利用这个酶活性测定方法,根据加入中药、藏药及天然产物的有效成分以及组合化学产物后RmlB酶蛋白的活性大小或有无建立了抗结核药物的模型。
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