本发明公开了一种制备RNA片段的方法,该方法包括:(1)获得化学合成的双链DNA;(2)将所述化学合成的双链DNA片段克隆至载体中以得到多个克隆的扩增质粒,并分别对多个克隆的扩增质粒进行DNA测序;挑选能够完全正确编码目的RNA片段的扩增质粒的克隆作为模板质粒;(3)对模板质粒进行酶切,得到酶切产物,并从酶切产物中分离能够完全正确编码目的RNA片段的转录模板片段;(4)对所述转录模板片段进行体外转录,得到转录产物。本发明还提供了如上所述的方法制备得到的RNA片段及其用途。本发明大幅度地提高了制备的RNA片段在序列和长度上的完全正确性和均一度。
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