本发明提供了一种提高里氏木霉纤维素酶液体深层发酵水平的方法,其中,包括以下步骤:一级种子培养:将PDA斜面培养基上活化后的里氏木霉(Trichoderma?reesei?CICC?13052)菌株制备成孢子悬液,按照3%的接种量接种于新鲜的种子培养基中进行培养;发酵培养:将处于对数生长期的一级种子液按照5%接种量接种至新鲜的发酵培养基中进行培养,分段控制发酵过程中罐内的pH值和溶解氧,使pH值和溶解氧在不同时段维持在不同的水平,并进行补料控制培养。通过本发明的方法发酵168小时结束,采用国际理论与应用化学联合会(IUPAC)推荐的国际标准方法测定发酵液酶活,得到滤纸酶活为14.2IU/mL,比工艺优化前间歇发酵酶活水平(8.5IU/mL)提高了67.1%。
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