本发明公开一种硫代缩酮连接单元及其合成方法、用途;所述硫代缩酮连接单元的结构如式(Ⅰ)所示 : 其中,R=?OH或者?COOH;R1与R2的满足如下条件中的一种:(1)R1=R2=甲基;或,(2)R1=苯基、对甲氧基苯基、2, 4, 6?三甲氧基苯基、萘基或对甲氧基萘基,R2=H;或,(3)R1、R2共同构成环己基或环戊基。该单元与核苷酸及荧光素连接得到的荧光素标记核苷酸可用于DNA测序。与现有技术相比,本发明连接单元的可逆终止剂用于DNA测序时,其延伸效率接近100%,并且在模板为连续多个相同碱基时,一次只延伸一个可逆终止剂;其合成所需原料简单易得,合成过程均为常规化学反应,可用于大规模推广使用。
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