本发明涉及药物化学领域,具体公开了利用FDH酶联荧光原理和AlphaScreen技术分别筛选ALKBH5小分子抑制剂的方法。该方法先成功构建并原核表达纯化得到纯度较高的ALKBH5重组蛋白,合成m6A修饰的ssRNA作为底物。用FDH酶联荧光原理和AlphaScreen技术检测ALKBH5的活性并建立其小分子抑制剂筛选平台。FDH酶联荧光反应体系稳定,所用试剂便宜,易得,背景低;AlphaScreen反应体系稳定,受到样品的干扰非常少,假阳性假阴性均低,可去除天然产物自发荧光的干扰,灵敏度高;这两种方法均易于实现微型化,通量高且相互补充,可实现ALKBH5小分子抑制剂的筛选。
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