本发明公开了泛素酶功能性匹配的筛选方法及应用,包括配制2×待测酶样品液及2×反应混合液;在96孔板的反应孔中进行孵育;在反应孔中加入10μLAMP‑Glo试剂,进行孵育;加入20μL AMP检测液,进行孵育;测发光强度。本发明中的泛素酶有效匹配的筛选方法可提供更高的准确度和可信度,所有的反应步骤均在同一个96孔板中均相完成,无需洗涤,分离等步骤,整个方案的完成只需约3个小时,因而具有更强的可操作性;另外,由于使用化学发光值作为最终结果的读出,本方案具有极高的灵敏度,从而从很大程度上减少了酶的用量,降低了研究成本;且本发明中还提供了泛素酶有效组合图谱,是当前所知第一次基于体外泛素化反应所获得的该类功能性图谱。
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