本发明公开了一种RT‑PCR一步法扩增试剂盒抗产物污染的方法,该方法为将现有一步法RT‑PCR扩增反应体系中加入特定的化学修饰的dUTP、dATP、dCTP、dGTP,以及UNG酶;同时将未经修饰的dTTP、dATP、dCTP、dGTP的终浓度均降至200nM以下,其他操作均同现有一步法RT‑PCR。本发明方法在一步法RT‑PCR扩增中,不仅具有很好的除产物污染效果,同时也保证了RT‑PCR的灵敏度,而现有防污染方法会明显降低RT‑PCR的灵敏度,影响实验的检测结果。本发明方法的灵敏度与常规的无抗污染体系的灵敏度接近,可以达到普通一步法RT‑PCR的检测效果和灵敏度,并不会降低PCR的灵敏度。
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