本发明属于生物工程技术领域,具体为一种红豆杉愈伤转化过程中农杆菌侵染的方法。本发明把红豆杉下胚轴作为外植体诱导愈伤组织,并经过培养获得胚性愈伤;用根癌农杆菌介导,采用农杆菌浸润的刀片切割红豆杉愈伤组织,将带有GUS基因的pCAMBIA1304质粒导入红豆杉愈伤组织,PCR检测外源潮霉素磷酸转移酶基因(HPT)的整合情况,组织化学方法检测GUS基因在组织中的表达情况,获得红豆杉的转基因愈伤组织;其中,刀面接触在愈伤组织的切面上形成一定的菌液梯度,从而覆盖转化所需的最佳菌液浓度,确保细胞得到成功转化,提高农杆菌转化的成功率,为红豆杉愈伤组织开展高效地遗传转化工程奠定的基础。
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