本发明公开了一种提高咖啡酸产量的菌株的制备方法和催化应用,选取一种出发质粒,在质粒的酶切位点连接单加氧酶基因HpaBC,获得环形质粒pHG04,以获得的环形质粒pHG04为模板,在其酶切位点连接脱氢酶基因FDH,获得环形重组质粒pHG05,再以大肠杆菌代谢菌为出发菌株,通过化学转化法导入环形重组质粒pHG05,获得构建重组菌株sHG05;以构建重组菌株sHG05作为生物酶,经过细胞培养并诱导,再催化4‑香豆酸制备咖啡酸,并检测咖啡酸的产量。本发明以大肠杆菌代谢菌为出发菌株,通过化学转化法导入重组质粒pHG05,获得一种新的生产咖啡酸的菌株,可作为生物酶催化4‑香豆酸制备咖啡酸,能够为反应过程提供了充足的胞内辅酶,降低底物残留,提高咖啡酸产量。
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