本发明涉及一种定量糖蛋白上N-连唾液酸化糖链占有率的方法及其在肝癌标志物筛选中的应用。首先取同一种状态下含糖蛋白的生物样品等量两份,然后用高碘酸钠溶液对其分别处理以进行差异氧化,之后利用蛋白层次上的酰肼化学法富集差异氧化后的样品中的糖蛋白,然后利用不同稳定同位素差异标记酰肼微球上的糖肽,再然后用肽糖苷酶PNGase F处理,最后对混合差异标记的N-糖肽进行质谱分析,以定量N-连唾液酸化糖链的占有率。本方法可以用于糖基化修饰的蛋白质组学分析,能同时获取相应的糖蛋白、糖肽和糖基化位点的鉴定结果,尤其可用于人肝癌(HCC)的潜在生物标志物的筛选。本方法简便,高效。
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