本发明公开了一种重组甘油激酶的制备方法及应用,首先,获取甘油激酶基因和表达载体,并利用化学转化法将构建得到的甘油激酶基因表达载体导入受体菌株,得到甘油激酶表达菌株;然后,在37℃‑25℃及转速为180‑200rpm的培养条件下,将所述甘油激酶表达菌株中任一单菌落进行诱导培养,并提取出蛋白粗提液;接着,利用镍柱对所述蛋白粗提液进行蛋白纯化,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测得到的目的蛋白的纯度;最后,利用分光光度法检测甘油激酶的活力及浓度,并将检测合格的液体甘油激酶进行冷冻干燥,得到重组甘油激酶,制备得到的重组甘油激酶主要应用于甘油和甘油三酯的检测,提高甘油激酶的综合性能。
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