本发明公开了一种对可溶性抗体进行纯化的方法。具体步骤为:首先将优化条件下诱导表达的600mL菌液离心后收集菌体,PBS重悬超声裂解(80W,30min),离心收集裂菌上清,经ProteinL柱纯化,10%SDS-PAGE监测纯化的效果;10%SDS-PAGE分离纯化的抗人大肠癌P-gp21Fab抗体,电转至PVDF膜;以HRP标记的山羊抗鼠IgG抗体震荡孵育后;ECL化学发光显影,定影;同时将人大肠癌P-gp21经10%SDS-PAGE电泳,电转至NC膜;纯化的Fab抗体作一抗,AP标记的马抗小鼠IgG抗体为二抗,BCIP/NBT显色。阴性对照为pComb3裂菌上清,阳性对照为抗Histag抗体。本发明的有益效果是,实验数据准确,可以定性、定量分析,同时为后续展开的人源化提供依据和支持。
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