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3-羟基丙酸高产菌重组质粒的构建方法

705   编辑：管理员   来源：中冶有色技术网  
2023-03-19 07:31:07
一种3-羟基丙酸高产菌重组质粒的构建方法属于生物化工生产领域。鉴于现有产3-羟基丙酸工程菌产量大都较低，发现了适用于肺炎克雷伯氏杆菌的高效tac启动子以及能转化3-羟基丙醛为3-羟基丙酸的puuc醛脱氢酶，并以此构建重组工程菌。将该酶编码基因的序列进行分析后，对该基因进行了化学合成。测序验证后将该启动子和酶在肺炎克雷伯氏杆菌中超表达，获得了重组肺炎克雷伯氏杆菌pET(ptac-puuc)，测定其体内及体外对3-羟基丙醛的催化能力。在体外，该酶对3-羟基丙醛的酶活达到26.31U/mg，是原代肺炎克雷伯氏杆菌(3.82U/mg)的6.9倍。在5L发酵罐中培养改造后的工程菌，经培养基成分、IPTG浓度条件优化后，其48h后3-羟基丙酸产量高达73g/L。
声明：
“3-羟基丙酸高产菌重组质粒的构建方法” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系该技术所有人。
我是此专利(论文)的发明人(作者)
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化学分析
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