本发明提供了一种在同一反应管中通过隔离实现多步骤反应的方法。该方法通过使用热熔性隔离层,将可能互相干扰的多步骤反应组分相互隔离,实现在封闭的一管内进行多步骤反应。本发明的方法隔离率高,重复性好,制备简易,可应用于RT‑PCR,RT‑qPCR,多重荧光高分辨率溶解曲线(HRM)分析、Taqman蛋白表达量检测,杂交反应、化学发光检测等。
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