核苷三磷酸(NTP)参与磷酸化反应,其中磷酸基团通过激酶从NTP转移到底物上。在激酶反应中提供的NTP的γ磷酸结合于电活性标记,导致该γ磷酸-电活性标记结合物从NTP转移到底物。电活性标记是一种有机部分,如醌或硝基杂环,或者是一种金属茂,如二茂铁或二茂钴。一旦γ磷酸-电活性标记结合物通过激酶转移到电极结合的底物,磷酸化的发生就通过循环伏安法进行
电化学检测。磷酸化也能够通过对携带了结合电活性标记的γ磷酸的底物进行质谱分析来检测。含有γ磷酸-电活性标记结合物的NTP适用于检测样品中激酶存在的方法,筛选调节激酶活性的候选化合物的方法,以及适用于诊断与激酶相关的疾病的方法。
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