本发明公开了一种DNA合成测序方法和测序系统,所述方法包括:通过水溶性双功能连接单元将引物P1连接于基体表面;在基体表面加入含待测DNA模板的溶液,然后进行等温表面放大反应;再将引物Pe加入基体表面,然后在基体表面加入四种碱基的荧光标记可逆终止剂的延伸反应溶液,进行延伸反应;然后对延伸后的DNA双链进行成像之后,加入相应的化学试剂,使荧光标记可逆终止剂的连接单元断裂。重复DNA链延伸和断裂步骤,完成多次循环测序,即得待测DNA模板核苷酸的碱基序列。本发明测序方法可用于DNA高通量合成测序,在所述测序条件下实验结果其读长至少为73碱基;如果双端测序,其读长至少为146,准确率至少为99.98%。
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