本发明提出一种实时观测枯草芽孢杆菌生物膜生长过程中不同基因表现型细胞数量和分布的方法,包括步骤:首先采用三色荧光标记的枯草芽孢杆菌菌种,三种荧光标记颜色分别对应生物膜生长过程中三种主要的细胞基因表现型细胞;将一定数量的细胞培养溶液嫁接到特定化学成分的琼脂培养基上,采用立体显微镜及相应的滤波片和红外透射光,观测随着生物膜的生长不同基因表现细胞在生物膜中的分布特点及其厚度变化,并对图片校准分析得到每一种基因表现型细胞的数量,及它们之间的转化率以及细菌生物膜生长的几何参数。该方法实现了在不破坏生物膜的情况下对生物膜生长过程的实时观测,同时得到不同基因表现型细胞的数量以及分布区域。
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