本申请公开了一种测序接头、构建方法、纳米孔建库试剂盒及应用。测序接头包括接头顶链和目标连接头,接头顶链包括沿预设测序方向设置的纳米孔引导链和第一连接基团,所述纳米孔引导链用于引导待测序列经过纳米孔测序通道;目标连接头包括与第一连接基团进行点击化学反应的第二连接基团,所述第二连接基团用于与待测序列连接。本申请提供的测序接头可避免使用连接酶,从而省去上机测序前的纯化处理步骤,提高测序效率,还可以避免使用连接酶造成的模板自连,人为引入嵌合序列,影响结构变异分析。
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