本发明公开了一种测定蛋白稳定性的方法。本发明的方法的具体步骤如下:(1)将待测蛋白与带化学反应活泼基团的荧光试剂进行反应形成化学键,再去除未反应的荧光试剂,制备携带荧光探针的蛋白样品;(2)对携带荧光探针的蛋白样品进行变性处理,至设定的变性强度值,然后降低或者增高变性强度,记录不同变性强度下测得的荧光值,绘制荧光值随变性强度变化的曲线,形成荧光值随变性强度增加和降低的轨迹;(3)通过分析荧光值随变性强度增加和降低的轨迹是否重叠,分析待测蛋白样品是否发生不可逆失活;其重叠时的最大变性强度值为蛋白发生不可逆失活的变性强度值。本发明的测定方法简单,结果准确。
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