本发明公开了一种定量T4多聚核苷酸激酶活性测定方法,所述方法包括如下步骤:在用于磷酸化的反应体系中,以寡核苷酸为底物,加入ATP,利用T4多聚核苷酸激酶使该寡核苷酸的5’端磷酸化,生成磷酸化寡核苷酸;随后向该反应体系中加入荧光素酶报告基因系统,该荧光素酶报告基因系统中的荧光素酶利用该反应体系中的剩余ATP使荧光素氧化生成氧合荧光素,同时产生化学发光;检测发光数值,由检测结果推导出T4多聚核苷酸激酶活性程度,其中该T4多聚核苷酸激酶活性程度与发光量负相关。与现有技术相比,本发明方法无放射性污染,操作简单方便,并且可以对T4多核苷酸激酶活性进行定量的检测分析。
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