本发明涉及一种检测豇豆胰蛋白酶抑制剂的免疫胶乳微球及其制备方法,该免疫微球由抗CpTI蛋白多克隆抗体包被,微球颗粒大小200nm;所述免疫胶乳微球的制备方法包括以下步骤:设计全长CpTI基因序列;将CpTI基因片段通过限制酶切割插入谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因融合表达载体中,构建细菌融合表达载体;利用亲合层析柱纯化获得GST-CpTI融合蛋白;将GST-CpTI融合蛋白抗原溶合弗氏佐剂后免疫小鼠,经分离纯化得到鼠抗CpTI多克隆抗体;将抗体通过化学偶联法偶联活化后的微球,得到检测CpTI蛋白的免疫胶乳微球。本发明的有益效果为:灵敏度较高,且操作简单、重复性强;所制备的免疫胶乳微球颗粒小,粒径均匀,能检测CpTI融合蛋白最低限0.2μg/ml,其相关系数R2=0.67。
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