本发明公开了一种增强MLPA检测SNP位点的特异性方法,设计针对Kras基因216G-CSNP位点的MLPA探针,使用MLPA实验,观察其对SNP位点检测时的影响,本发明的核心是在SNP位点检测特异度时减少探针在SNP位点的错配率,可以使用特定化学修饰的核苷酸合成探针,本研究发现使用LNA修饰MLPA探针的SNP位点后,LNA修饰可明显降低碱基错配率,消除假阳性产物峰;但LNA修饰探针的检测灵敏度有所下降,表现为检测阳性标本时,与未加修饰的MLPA探针相比,产物峰面积下降LNA修饰可能导致探针杂交或连接效率下降,降低了MLPA检测的灵敏度。
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