本发明涉及一种检测组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)的免疫胶乳微球及其制备方法,该免疫微球由抗hbFGF蛋白多克隆抗体包被,微球颗粒大小50nm;所述的免疫微球制备的方法,是根据原核细胞表达的优先密码子重新修饰并构建全长人bFGF(hbFGF)基因表达序列,将基因序列通过限制酶切割插入谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因融合表达载体中并进行细菌表达,利用亲合层析柱纯化获得GST-hbFGF融合蛋白,以凝血酶切割该融合蛋白,经亲合层析柱去除凝血酶后获得人bFGF,再将佐剂溶合抗原后免疫小鼠,经分离纯化得到hbFGF多克隆抗体,将抗体通过化学偶联法偶联活化后的微球,得到检测hbFGF的免疫胶乳微球;所述的检测hbFGF的应用,是指通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法,检测hbFGF样品,最低检测限为hbFGF蛋白50pg/ml,相关系数R2=0.83;该免疫胶乳微球用于检测重组人碱性成纤维细胞生长因子灵敏度较高,且操作简单、重复性强。
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