本发明在固相支持物(solid substrates)表面制备一种双链脱氧核糖核酸(double-strandedDNA,dsDNA)微阵列(microarray),使其dsDNA探针(probes)上嵌合核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)的序列特异性DNA结合位点(sequence-specific DNA-binding sites),用以高通量检测(high-throughput detecting)细胞核内NF-κB的含量及筛选dsDNA/NF-κB相互作用干扰性分子(molecules interfering dsDNA/NF-κB interaction)。本发明首先依靠专利技术(中国专利02112780.8及02137945.9)及其它本发明提出的方法,在固相支持物表面制备dsDNA微阵列,使该dsDNA微阵列上的大量dsDNA探针上含有NF-κB的序列特异性DNA结合位点,再将该dsDNA微阵列与特定细胞核蛋白或NF-κB纯蛋白杂交结合,通过NF-κ、B与微阵列靶点dsDNA的相互作用,实现对特定细胞核中NF-κB蛋白的定性或定量测定,或通过检测在外源分子,如组合化学分子、天然生物分子的存在下,NF-κB与微阵列靶点dsDNA相互作用特征的改变,筛选能够干扰NF-κB与其靶点dsDNA的相互作用的分子,特别是能够降低NF-κB与其靶点dsDNA结合亲合性(binding affinity)的组合化学或天然生物小分子。本发明制备的NF-κB检测dsDNA微阵列
芯片,在基础分子生物学研究,特别是NF-κB相关基因表达调控和生物医学研究,如NF-κB相关疾病药物作用机理研究和药物性分子筛选中有广泛而重要的应用价值。
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