本发明提供了一种维生素B12定量检测试剂盒及其应用,涉及生物技术领域。所述维生素B12检测试剂盒包括校准品、质控品、抗试剂、磁微粒试剂、试剂C和发光底物,其中,所述抗试剂的制备步骤为:将内因子与异硫氰酸荧光素偶联,VB12衍生物与碱性磷酸酯酶偶联,分别获得异硫氰酸荧光素标记的内因子和碱性磷酸酶标记的VB12衍生物,将异硫氰酸荧光素标记的内因子和碱性磷酸酶标记的VB12衍生物加入抗试剂缓冲液中,充分搅拌;磁微粒试剂的组分为异硫氰酸荧光素抗体偶联的羧基磁珠。本发明既能提高检测的灵敏度和可靠性,又能降低成本,还可配合全自动化学发光免疫分析仪使用。
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