本发明提供了一种检测乙酰辅酶A羧化酶活性的方法,属于生物化学和分子生物学领域。乙酰辅酶A羧化酶活性检测的原理主要是通过酶促反应体系中丙二酸单酰辅酶A或ADP浓度的变化反映酶的活性。已有的方法由于涉及到放射性同位素的使用,以及受到ATP酶的潜在影响,存在安全性、特异性差等问题。本方法的特征在于制备含有乙酰辅酶A羧化酶的蛋白制品或样品上清液后,与乙酰辅酶A、ATP及NaHCO3等构成体外反应系统,再通过酶联免疫吸附分析的方法检测一定时间内丙二酸单酰辅酶A浓度的变化,从而计算样品中酶活性的大小。本方法不使用放射性同位素、特异性高、易操作,适用于各种生物样品中乙酰辅酶A羧化酶活性的分析。
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