本发明提供一种化学合成的H7N9禽流感病毒NA蛋白胞外区抗原片段及制备方法和应用,涉及基因工程技术领域。该方法通过生物信息学分析,筛选出H7N9禽流感病毒NA蛋白胞外区抗原片段,基于E.coli原核生物偏爱密码子进行密码子优化,化学合成抗原表位的全新基因序列;然后利用基因工程技术,构建具有编码NA胞外区域的DNA表达载体,将该载体转化到感受态细胞中,从而得到以包涵体形式表达的重组tN9;对该包涵体进行超声处理得到重新折叠的重组tN9;通过SDS‑PAGE收集并分析正确折叠的tN9,进行蛋白亲和纯化和质谱分析。本发明制备的重组蛋白可用于H7N9禽流感感染NA抗体的检测及单抗和多抗制备,为深入探索NA的蛋白结构及功能、H7N9禽流感病毒致病机制和建立快速检测方法奠定基础。
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