本发明涉及化学、生物技术领域,具体涉及了一种联合金纳米探针和CRISPR‑Cas的蛋白标志物检测方法。将免疫分析、纳米技术和CRISPR检测技术三者相结合,通过在金纳米粒子上共价连接适配体和CRISPR激活链得到金纳米探针。通过抗体与适配体对蛋白标志物的特异性识别作用,在96孔酶标板中形成抗体‑分析物‑金纳米探针的夹心结构。金纳米探针上的激活链可以激活CRISPR蛋白的旁切割活性,切割荧光报告分子产生荧光信号,从而对分析物进行定量检测。本发明利用金纳米探针实现了分析物识别信号到CRISPR旁切割活性信号的转化,同时实现了激活链信号的放大。所述检测方法操作简单、灵敏度高、特异性强和检测线性范围宽。
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