本发明涉及一种粘蛋白型O‑连接糖基化(O‑GalNAc型)检测方法。本发明基于生物酶选择性氧化‑生物正交化学反应相结合的策略,利用半乳糖氧化酶将半乳糖6‑羟基特异性氧化为醛基,并通过酰肼化学实现了糖肽的特异性捕获与释放,并利用基于质谱的检测方法实现了O‑GalNAc糖型高灵敏度分析,可以从50μL的人源血清中检测到59个O‑GalNAc型糖基化修饰序列,对应超过30个O糖化蛋白上。本方法具有检测灵敏度高、富集特异性高等特点,是对现有的内源性O‑GalNAc型糖基化蛋白/肽段分析的重要手段。
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