本发明公开了一种内切酶辅助的RNA中肌苷修饰的单碱基分辨率定位方法,属于生物技术领域。本发明首先使用3’‑deoxy‑A封闭RNA 3’OH末端,随后hEndoV蛋白在肌苷处切割产生新的RNA 3’OH,新的3’OH进行多聚尿苷化和文库构建,测序获得肌苷修饰的位点信息。本发明原理直接、操作简便,全程无化学反应使RNA免于降解,无需复杂的生物信息学算法,可以直接获得RNA中肌苷修饰的单碱基分辨率定位信息。
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