本发明涉及应用于焦磷酸测序的化学修饰引物介导的方向特异性单链DNA制备。具体地说在PCR时一条引物用普通合成的引物,而另一条引物用可以抗酶切的化学修饰引物,PCR扩增后再利用有5’→3’切割功能的外切酶处理双链DNA,将未修饰的DNA单链消化掉,制备方向特异的单链模板DNA。应用这种方法制备单链DNA可以直接用于作为焦磷酸测序的模板,大大降低了焦磷酸测序的成本,减少了测序模板制备的繁琐步骤。
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