本发明一种用超敏化学发光酶联免疫吸附定量 测定人Her-2/Neu癌基因可溶性产物sp185Her -2的方法。使用奥地利Bender MedSystems GmbH公司的一对抗sp185Her- 2单克隆抗体,采纳固相双位点夹心式酶联免疫 吸附技术,用抗sp185Her-2单克 隆抗体包埋小容量微孔后,样本中sp185Her- 2结合在包埋抗体上;加入辣根过氧化酶(HRP) 联结的单克隆抗sp185Her-2抗 体后,它和已被第一抗体捕获的sp185Her- 2结合;孵育后洗除未结合的抗 sp185Her-2酶联结抗体;加入辣 根过氧化酶超敏化学发光底物后;通过化学发光仪测定425nm 处发光量来定量样本中sp185Her- 2浓度。本法检测线性范围0-10ng/ml sp185Her-2 (R2=0.9999),最低检测限度 40.15pg/ml sp185Her-2。本发明 改进Bender MedSystems ELISA,采用小容量微孔板,在不影 响反应敏感性的前提下,减少了包埋抗体和其他反应试剂的使 用量,加快了反应速度;采用超敏化学发光底物和化学发光仪, 加宽了检测线性范围,使检测限度下移,提高了反应敏感性。 人血清Her-2/Neu癌基因可溶性产物sp185Her -的测定,实时观察乳腺癌患者术后 sp185Her-含量的变化,有助于 预后的临床评估。本发明为进一步研发临床适用的诊断试剂盒 奠定了基础。
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“超敏化学发光酶免法测定人肿瘤可溶性蛋白sp185Her-2” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
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