本发明公开一种纳米氧化铜为催化剂的流动注射化学发光测定胆固醇的方法,包括如下步骤:将胆固醇、胆固醇氧化酶和磷酸盐缓冲溶液混合温浴后成反应液,将反应液稀释后,经蠕动泵运输进入混合器中与纳米氧化铜胶体溶液混合,而后与鲁米诺溶液混合,三者混合后进入流动池反应,产生的化学发光强度经光电倍增管检测以测定胆固醇。利用胆固醇氧化酶催化胆固醇氧化产生过氧化氢,结合流动注射技术,增强胆固醇测定中的化学发光信号,增强倍数约为600,利用胆固醇-胆固醇氧化酶-鲁米诺-纳米氧化铜流动注射化学发光法对胆固醇含量进行测定,线性范围为0.625~12.5umol/L。可应用于食品中胆固醇含量测定以及血清中游离胆固醇与总胆固醇的测定。
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